血常規(guī)檢驗是診斷各種血液病的主要依據(jù),影響血常規(guī)檢驗結(jié)果的因素很多,要想取得準確的檢驗數(shù)據(jù),就要在實驗的每一個步驟中都嚴格按照操作規(guī)程進行。三得醫(yī)學科技有限公司列舉幾點血液細胞檢驗中的注意事項。
標本的采集
為了取得準確、可靠的檢驗結(jié)果,必須取得高質(zhì)量的標本。高質(zhì)量的標本是高質(zhì)量檢驗的第一步。保證血液標本中各項細胞的形態(tài)完整是血常規(guī)高質(zhì)量標本的最基本的要求。血液細胞檢驗標本的制備分為采集和抗凝2個步驟。
1.標本的采集
(1)采血部位的選擇
最常用的途徑是靜脈采血和末梢毛細血管采血。各類文獻均表明,靜脈血血樣是最可靠的標本,手指血是末梢毛細血管血樣中與靜脈血差異最小且較為穩(wěn)定的血樣。有研究表明,與靜脈血相比,手指血的準確性和可重復(fù)性仍然較差:白細胞計數(shù)明顯升高而血小板計數(shù)明顯減低。因此,絕大多數(shù)專家建議:血常規(guī)檢驗特別是應(yīng)用血液分析儀時,應(yīng)使用靜脈血。
(2)采集靜脈血
要注意不能在患者輸液滯留針處或輸液靜脈同側(cè)血管采集標本,以免造成血液稀釋;止血帶壓迫時間過長(<1 min ),以免瘀血和血液濃縮。
2.標本的抗凝
用于血常規(guī)檢驗的血樣必須經(jīng)抗凝劑抗凝處理,在目前的眾多抗凝劑中,EDTA鹽(EDTA-Na2,EDTA-K2,EDTA-K3)是對白細胞形態(tài)和血小板影響相對較小的抗凝劑,最適合用于血常規(guī)檢驗。除采血因素的影響(生理性因素、采血部位等)外,多數(shù)情況下,血樣的質(zhì)量取決于血液和抗凝劑的比例。血液比例過高時,由于抗凝劑相對不足,血漿中出現(xiàn)微凝血塊的可能性增加,在用于血細胞分析儀時,微凝血塊可能阻塞儀器,同時影響一些檢驗指標。血液比例過低,抗凝劑相對過剩,對檢驗指標會造成嚴重影響。血液經(jīng)EDTA抗凝后,白細胞的形態(tài)會發(fā)生改變,這種改變和時間及EDTA濃度有關(guān)。EDTA的最佳濃度(與血液比)為1.5 mg/ml,如果血樣少,EDTA的濃度達到2.5 mg/ml,中性粒細胞腫脹、分葉消失,血小板腫脹、崩解、產(chǎn)生正常血小板大小的碎片,這些改變都會使血常規(guī)檢驗和血細胞計數(shù)得出錯誤結(jié)果。這一點在用自動血細胞分析儀時尤為重要。
儀器的校準
血細胞分析儀只能用儀器配套的校準物對儀器進行校準,一些血細胞分析儀無配套的校準物,這種情況下,實驗室只能使用經(jīng)二級標準血液分析儀或規(guī)范操作的監(jiān)測系統(tǒng)定值的新鮮血作為校準物對儀器進行校準。有數(shù)臺的分析儀的需先對其中一臺進行校準后,在用新鮮的全血對其他臺進行校準。至少半年校準一次。實驗室有數(shù)臺血細胞分析儀的,為了保證不同儀器間檢測結(jié)果的可比性和準確性,需對每臺儀器進行室內(nèi)質(zhì)控、儀器校準等,以保證檢測質(zhì)量的措施,此外,還需定期用新鮮血標本在實驗室內(nèi)不同型號的儀器上進行結(jié)果比對。
標本的儲存
抗凝全血標本應(yīng)在室溫條件下(一般血液分析儀要求的室溫條件是8 ℃~25 ℃)。如前文所述,抗凝劑因時間和濃度的不同,會造成對血細胞形態(tài)的影響。有研究表明,用EDTA抗凝靜脈血標本,8h內(nèi)(室溫)檢測,可以得到最佳的檢測結(jié)果。白細胞2h后粒細胞形態(tài)可出現(xiàn)變化;如果不能在有效時間內(nèi)及時用儀器進行檢測時,須盡快推制血涂片,以便必要時用顯微鏡對血涂片進行復(fù)查。雖然2℃~8℃可延長保存時間,但血小板的體積會逐漸發(fā)生改變EDTA鹽與血液混合后血小板形態(tài)逐漸變?yōu)榍蛐?,體積由所增大,又研究表明可增大20%左右,1h后才趨于穩(wěn)定,1h~6h后的變化小于3%,故使用血液分析儀對紅細胞比容檢測時應(yīng)在采血1h后進行。如果不需要血小板和白細胞分類的準確數(shù)據(jù),則標本可以在2 ℃~8 ℃的條件下存入至24h。