生化清洗液小編為你介紹一下常見發光免疫分析技術的代表儀器中的電化學發光
電化學發光的原理是對電極施加一定的電壓進行電化學反應,反應的產物之間或與體系中某種組分發生化學發光,用普通光學手段測髓發光光譜軍Ⅱ強度從麗對物質進行衡量分析的一種方法。與化學發光有所不同,其差異在予氧化反應是通過電極上的電化學反應產生的,而不是氧化劑或發光劑自身內氧化產生,其標記物為三聯吡啶釕及其衍生物Ru(bpy)3 2 ,并以三丙胺(TPA)為還原荊。如圖1所示,Ru(bpy)32十穰TPA分剃在弼投裊囂氧化成Ru(bpy)3 3 搬TPA的陽離子自由基IPA ,IPA 迅速脫去一個質子形成TPA自由基,TPA具有強的還原性,從而把Ru(bpy)3 3 還原為激發態的Ru(bpy)3 2 ,后者發射一個620 nm的光子回到基態再參與下一次電化學發光。必需0.01毫秒就可發出穩定的光,每毫秒幾十萬次的循環電化學發光,大大提高了分析的靈敏度。另外,通過電極反應在線制備了不穩定的發光劑Ru(bpy)32 緲程TPA,避免了直接使用Ru(bpy)3 2 對分析測試的影響。
電純學發光的主要特點是發光過程中的標記物基本不被消耗,麗反應體系中其他成分充分過量,因此發光倍號強而穩定,且發光時間較長。其缺點為測量方式復雜、儀器成本及維護費用高;同時環境及樣品中同類元素也存在較弱的本底干擾。反復使用的流動池可能導致交叉污染;而沖洗或進樣中產生的氣泡也會干擾測定;同時繁瑣冗長的沖洗過程也會成為提高檢測效率的瓶頸。另外使用磁性或非磁性微粒時,強烈的散射吸收作用也會降低靈敏度。
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